洁净区沉降菌取样方法需结合规范操作与动态管理，具体流程如下：

一、采样前准备

1. 培养基准备

   • 使用普通营养琼脂培养基，需在121℃湿热灭菌20分钟，冷却至45℃后无菌操作注入培养皿（每皿约15ml），凝固后倒置备用。

   • 若使用大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA），需在20℃~25℃培养5天；沙氏培养基（SDA）需在20℃培养5天。

2. 环境准备

   • 确保洁净区已消毒，温度控制在18℃~26℃、相对湿度45%~65%。

   • 采样前需对操作人员、仪器及环境进行清洁消毒。

二、采样方法

1. 静态采样

   • 将培养皿按洁净区沉降菌采样点布置图放置，打开盖子后暴露30分钟以上，再倒置。

   • 静态采样适用于人员活动较少、空气净化系统稳定的区域。

2. 动态采样

   • 在正常生产且空气净化系统运行时进行，暴露时间不超过4小时。

   • 动态采样点应避开回风口等污染源，确保采样代表性。

三、菌落计数与结果判定

1. 计数方法

   • 用肉眼直接计数菌落数，标记或使用菌落计数器点计，必要时用5-10倍放大镜检查遗漏。

   • 若菌落重叠可分辨，仍以实际可见菌落数计数。

2. 结果判定

   • 每个采样点的沉降菌总数需低于洁净区等级标准，例如10万级洁净区≤5CFU/125cm²。

   • 每批培养基需设置3只对照培养皿，检测培养基是否污染。

四、注意事项

1. 采样点设置

   • 根据洁净区面积计算最少采样点数（如100m²洁净区≥40个采样点）。

   • 关键设备、管道等易污染区域需增加取样点。

2. 时间与人员要求

   • 静态采样后需等待至少20分钟再操作，避免人员走动污染。

   • 操作人员不得超过2人，避免交叉污染。

3. 培养基保存

   • 制备好的培养基需在2~8℃冷藏保存，避免微生物污染。

通过规范操作与动态管理，可有效评估洁净区沉降菌水平，确保生产环境符合要求。