植物提取DNA的步骤及原理如下：
步骤
- 样本准备：
- 选择适合的植物样品，如新鲜叶片、茎段或种子。
- 样品应尽可能新鲜，并避免污染或损伤。
- 细胞破碎：
- 将样品放入液氮中迅速冷冻，然后用研钵和研钉对样本进行研磨，直至样本完全破碎。
- 溶解细胞膜：
- 将研磨后的细胞悬浮液转移到离心管中，并加入含有洗涤剂的细胞裂解液。
- 洗涤剂能够破坏细胞膜，使DNA从细胞中释放出来。
- 沉淀DNA：
- 将细胞裂解液置于高速离心机中进行离心，离心过程中，DNA会被沉淀到离心管底部形成一个白色的沉淀物。
- 离心后，将上清液倒掉，只保留沉淀物。
- 洗涤DNA：
- 使用75%乙醇溶液洗涤DNA沉淀物，以去除离心过程中残留的盐和洗涤剂等杂质。
- 洗涤后，用吸管或微量移液器将乙醇溶液完全抽尽，避免干燥过程中DNA沉淀物溶解。
- 溶解DNA：
- 将洗涤后的DNA沉淀物用适量的溶解液溶解，常用的溶解液包括TE缓冲液或纯净水。
- 溶解后的DNA溶液可以用于后续的实验操作，如PCR扩增、酶切等。
原理
- 细胞裂解：使用研磨缓冲液破坏细胞壁，释放细胞内的DNA。
- DNA溶解：细胞裂解液中的洗涤剂（如CTAB）能够破坏细胞膜，使DNA从细胞中释放出来。
- 沉淀DNA：通过离心，DNA分子由于其较大的分子量而沉淀到离心管底部，而其他细胞碎片和杂质则在上清液中。
- 洗涤DNA：使用的乙醇溶液能够去除离心过程中残留的盐和洗涤剂等杂质。
- DNA溶解：将DNA沉淀物溶解在适当的溶解液中，得到DNA溶液。
以上信息仅供参考，如需了解更多信息，建议咨询专业人士或查阅相关书籍文献。
