胶体金免疫层析技术中的C线(质控线)显色原理是检测过程中用于验证试纸有效性的关键步骤。其核心机制如下:
一、C线的基本作用
C线固定有与胶体金标记抗体结合的抗体(如抗胶体金偶联抗体),用于检测试纸条是否有效。无论样品中是否含有目标抗原,C线都应保持显色,作为实验的阴性对照。
二、显色原理
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抗体结合与聚集
当含有目标抗原的样品通过试纸条时,目标抗原与胶体金标记的特异性抗体结合,形成抗原-抗体复合物。这些复合物随样品流动到达C线。
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胶体金颗粒的捕获与聚集
在C线中,固定抗体与胶体金偶联抗体特异性结合。当抗原-抗体复合物流经C线时,复合物中的目标抗原会与C线抗体结合,导致胶体金颗粒被捕获并聚集。
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显色反应
聚集的胶体金颗粒在C线中形成可见的红色条带,表示C线有效且抗体结合正常。
三、与T线显色的区别
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T线显色 :当样品中的目标抗原与T线固定抗体结合后,抑制了C线抗体的结合,导致T线显色而C线不显色,表示检测阳性。
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C线显色 :无论T线是否显色,C线始终应显色。若C线不显色,则说明试纸条失效(如抗体失效或胶体金未正确标记)。
四、重要性
C线显色是确保检测准确性的基础。若C线未显色,需检查抗体浓度、胶体金标记效率或试纸条是否损坏,避免假阴性结果。只有C线正常显色时,T线的显色结果才具有可靠性。
C线显色通过抗体-抗原结合和胶体金颗粒聚集实现,是免疫层析检测中不可或缺的质控环节。