DNA提取的三种常见方法如下:
一、苯酚-氯仿抽提法
- 原理:利用苯酚和氯仿混合液破坏细胞膜结构,使蛋白质变性并与DNA分离。离心后DNA溶于上层水相,通过乙醇沉淀获得DNA。
- 特点:成本低且去蛋白效果显著,但需多次抽提导致DNA损耗,操作涉及有毒试剂。
二、高盐沉淀法
- 原理:通过高浓度盐溶液(如NaCl)改变核酸溶解度,使DNA与蛋白质分离后沉淀。常用SDS等去污剂辅助裂解细胞。
- 特点:省略有机试剂抽提步骤,操作简便,但DNA纯度受样本类型影响较大。
三、柱式法
- 原理:利用硅胶膜在高盐条件下特异性吸附DNA,低盐缓冲液洗脱杂质后回收纯化DNA。
- 特点:快速高效、纯度稳定,适用于试剂盒标准化操作,但需专用耗材。
这三种方法分别代表了传统化学抽提、改良盐析法及现代固相萃取技术,实际应用中可根据样本类型、实验条件和纯度要求进行选择。