乙肝两对半主要应用于乙肝病毒感染检查，其主要包括乙肝病毒表面抗原、乙肝病毒表面抗体、乙肝病毒E抗原、乙肝病毒E抗体以及乙肝病毒核心抗体。
如果检查结果提示乙肝病毒表面抗原阳性，则常代表患者已被乙肝病毒感染。如乙肝病毒表面抗原阴性而乙肝病毒表面抗体阳性，则提示患者体内存在乙肝病毒保护性抗体。
一旦明确诊断为乙肝病毒感染，需要进一步进行肝功能检查，如肝功能存在异常，则可以明确诊断为乙肝，进一步需要进行乙肝病毒DNA检查，判断乙肝病毒复制率，必要时使用抗病毒治疗。
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