胶体金试纸条的显色原理基于免疫层析技术,通过抗原与抗体的特异性结合以及胶体金的标记作用实现检测。具体原理如下:
一、基本组成与结构
-
核心结构
胶体金试纸条由三部分组成:
-
样本垫 :待检测样本(如尿液)在此处与抗体或抗原结合;
-
结合垫(金垫/微孔模式) :固定有特异性抗体或抗原,用于捕获目标物质;
-
硝酸纤维素膜(NC膜) :作为载体,将样本、结合垫和胶体金固定在一起。
-
-
胶体金特性
胶体金颗粒在可见光范围内因等离子共振效应呈现红色,其颜色变化可通过肉眼观察。
二、显色机制
-
抗原抗体结合
当样本中的目标抗原(如HCG)流动到结合垫时,与固定抗体(如抗HCG单克隆抗体)特异性结合,形成抗原-抗体复合物。
-
T线显色 :若样本中存在目标抗原,结合垫上的抗体与抗原结合后,样本继续流动到T线,T线上的抗体与抗原-抗体复合物结合,导致胶体金颗粒聚集显色;
-
C线显色 :样本中的抗体或胶体金偶联抗体随样本流动到C线,与固定抗体结合,形成胶体金-抗体复合物,显色红色。
-
-
结果判读
-
阳性 :T线显色(两条红带),C线不显色,表明样本中存在目标抗原(如HCG,用于早孕检测);
-
阴性 :T线不显色,C线显色,表明样本中无目标抗原。
-
三、应用示例(以早孕试纸为例)
-
检测流程
尿液样本滴加在试纸上,样本中的HCG与T线上的抗HCG抗体结合,形成复合物后随样本移动到T线并显色。C线上的羊抗鼠抗HCG抗体与胶体金偶联抗体结合,始终显色作为对照。
-
结果判断
-
双杠 :T线和C线均显色,HCG浓度达到检测阈值,提示妊娠可能;
-
单杠 :仅C线显色,HCG浓度未达标,提示未妊娠。
-
四、注意事项
-
特异性 :抗体需针对特定抗原决定簇,避免交叉反应;
-
灵敏度 :样本量、抗体浓度等因素可能影响检测结果。
通过上述机制,胶体金试纸条实现了快速、便捷的定性检测,广泛应用于医疗诊断、环境检测等领域。