鱼肉中组胺含量的测定

测定鱼肉中组胺含量的方法有多种,以下是几种常见且有效的方法:

1. 液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)

原理:利用液相色谱分离组胺,再通过质谱进行定量分析

  1. 1.样品前处理:取2g鱼肉样品,加入标准品和去离子水,震荡5分钟。
  2. 2.萃取:加入乙腈水溶液,震荡10分钟,离心5分钟。
  3. 3.净化:取上清液通过FaTEx-his组胺专用柱,收集滤液。
  4. 4.分析:将滤液上机到LC-MS/MS进行分析

2. 高光谱成像技术(HSI)

原理:通过高光谱扫描系统分析鱼肉中的组胺分布,快速、无损地检测组胺含量

    1.样品扫描:使用高光谱扫描系统对生金枪鱼样品进行扫描。

    2.数据分析:基于扫描数据,使用软件(如Insight)开发分类模型,计算组胺浓度。

    3.结果呈现:结果可以可视化呈现,也可以通过协议传输

3. 比色法

原理:鱼肉中的组胺用正戊醇提取,与偶氮试剂反应显橙色,与标准系列比较定量

    1.标准曲线制定:配制不同浓度的组胺标准溶液,与偶氮试剂反应,测定吸光度,绘制标准曲线。

    2.样品提取:取10.0g鱼肉,加入三氯乙酸浸泡,过滤后用NaOH调节pH至9-10,用正戊醇提取三次,合并上层液。

    3.显色反应:取提取液,加入Na2CO3和偶氮试剂,反应10分钟后测定吸光度。

    4.计算:根据吸光度值和标准曲线计算组胺含量

4. 显色法试剂盒

原理:利用组胺脱氢酶特异性分解组胺,通过四唑盐显色测定吸光度,计算组胺浓度

    1.样品制备:将鱼肉剁碎,加入提取用溶液,搅拌均匀。

    2.加热处理:沸水浴20分钟,加热处理后冷却。

    3.过滤:用滤纸过滤提取液。

    4.显色反应:加入显色试剂和酶溶液,37℃孵育15分钟,测定吸光度。

    5.计算:根据吸光度值计算组胺含量

5. 快速检测法

原理:利用快速检测卡,通过显色反应快速判断组胺含量

    1.样品处理:将鱼肉打浆,加入提取液,震荡混匀,静置。

    2.检测:取上清液滴入速测卡加样孔中,4-5分钟内读取结果。

    3.结果判定:根据显色条带判断组胺含量

注意事项

  • 样品新鲜度:组胺含量与鱼的新鲜度密切相关,不新鲜的鱼会产生更多组胺。
  • 前处理:不同方法的样品前处理步骤有所不同,需根据具体方法操作。
  • 仪器设备:部分方法需要特定的仪器设备,如LC-MS/MS、高光谱扫描系统等。

结论

选择合适的测定方法取决于具体需求和条件。LC-MS/MS和高光谱成像技术适用于高精度和快速检测,而比色法和显色法试剂盒则适用于常规实验室和现场快速检测。

提示:本内容不能代替面诊,如有不适请尽快就医。
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