化学实验中的透析操作步骤如下:
- 准备透析袋和透析液 :
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选择合适的透析袋,确保其分子量截留值远大于样品中大分子物质的分子量。
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准备透析液,通常为缓冲液,其pH值和离子强度应根据实验需求进行配制。
- 前处理透析袋 :
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将透析袋剪成适当长度,用蒸馏水冲洗干净,然后用封口机密封一端。
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将待透析的溶液装入透析袋中,注意不要使透析袋过度膨胀,以免破损。
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用封口机密封透析袋的另一端,确保密封良好。
- 透析过程 :
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将装有溶液的透析袋放入装有透析液的容器中,确保透析袋完全浸没在透析液中。
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开启磁力搅拌器,搅拌透析缓冲液,以提高透析效率。
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定期取样测定溶液的浓度、pH值等参数,以判断透析是否完成。
- 结束透析 :
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当溶液中的小分子杂质浓度降至满意水平时,结束透析。
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用无菌注射器将透析袋中的溶液收集到无菌容器中。
- 分析与检测 :
- 对透析后的溶液进行必要的分析检测,如蛋白质浓度、活性等。
注意事项:
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透析过程中要随时用玻棒搅拌液体,以保持溶液的均匀性。
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每30分钟从烧杯中取水1ml,用10%HNO3酸化溶液,再加入1%AgNO3溶液,检查特定离子的存在。
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透析袋在使用前后都需要进行清洗和检查,确保其无损坏。
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透析液的配制和储存应遵循安全规范,避免细菌生长。
通过以上步骤,可以有效地进行化学实验中的透析操作,实现小分子物质与大分子物质的分离和纯化。